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ELISA實(shí)驗(yàn)樣本處理的注意事項(xiàng)
ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理辦法是不一樣的。試驗(yàn)樣本的處理可謂是ELISA試驗(yàn)的關(guān)鍵過程之一，所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細(xì)說說！
一、均質(zhì)
①安排樣本：肉、肝食品類切細(xì)，用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎，混合均勻。
②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細(xì)，用均質(zhì)器均漿；質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充沛混勻。
④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去外表的水分，取食用部分。
二、振動(dòng)提取
將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中，振動(dòng)，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排內(nèi)部，提取待測組分。
①振動(dòng)辦法：振動(dòng)器上進(jìn)行上下、往復(fù)式振動(dòng)、手搖式上下振動(dòng)。
②在安排樣本中參加有機(jī)溶劑之間提取時(shí)，ELISA試劑盒應(yīng)邊加邊振動(dòng)，防止安排凝結(jié)成團(tuán)，不利于提取。
三、乳化現(xiàn)象
在用有機(jī)溶劑提取過程中，假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象，處理的辦法有：
①用細(xì)頭輕輕的拌和，損壞乳化后，再重復(fù)離心。
②再參加適量的提取劑，重新振動(dòng)。注意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。
四、濃縮
因?yàn)閮艋^程中引進(jìn)的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接剖析，需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理過程中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈桑儆脧?fù)溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮辦法：氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。
請注意：
①在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質(zhì)攪擾。
②在吹樣本時(shí)，針頭應(yīng)在液面上空，防止與樣本觸摸，防止發(fā)生交叉污染。
③樣本吹干后應(yīng)立即取下，防止吹的時(shí)刻過長，影響zui終檢測結(jié)果。
④不同的藥物，吹干后樣本的保質(zhì)期不同，ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
五、凈化
經(jīng)過提取的待測組分中一般含有一些會攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)別離的過程，咱們稱為試劑盒中樣本的凈化。在咱們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到常見的凈化是：液液分配法。比方：用復(fù)溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適量的正己烷，在參加正己烷和復(fù)溶液渦動(dòng)后假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象，能夠60℃水浴加熱，至乳化現(xiàn)象消失或削弱后，加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。
