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恒遠(yuǎn)生物|HL-1 (小鼠心肌細(xì)胞)產(chǎn)品說明


貨號(hào):HYCC20114
規(guī)格:T25
形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件:MEM+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
凍存條件:無血清細(xì)胞凍存液
特別說明:本庫的細(xì)胞系(株)僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的。使用者不得將本庫細(xì)胞系(株)轉(zhuǎn)讓給第三者。

一、細(xì)胞收到后處理

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)某R娹k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察:未超過80%匯合度時(shí),可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)若是5%CO2的培養(yǎng)箱,可用密封培養(yǎng)瓶,擰緊瓶蓋后放入5%CO2培養(yǎng)箱,48H內(nèi)要換液一次

二、細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解答

1.培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?
因?yàn)榕囵B(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色,指示pH范圍為6-8,顏色會(huì)由黃變?yōu)樽霞t。這是為了我們能更直觀觀察培養(yǎng)液的變化,如變黃,則代表偏酸,偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說,細(xì)胞吸收營養(yǎng)后,變黃后就暗示我們要換培養(yǎng)基啦!所以密切觀察很重要哦!

2.細(xì)胞的居住環(huán)境
舒適無菌的環(huán)境是細(xì)胞健康生活的重要基礎(chǔ)。如下圖為培養(yǎng)細(xì)胞的器皿,包括形狀、規(guī)格、用途多樣的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)板。最終住進(jìn)37℃,5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱。

3.細(xì)胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶區(qū)別?
就細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)來說,培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿沒有太大區(qū)別,主要在于安全系數(shù)(培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)、培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量(大培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)。但是培養(yǎng)瓶成本也會(huì)相對(duì)較高,因此無特殊要求,一般選擇培養(yǎng)皿即可。

4.為什么細(xì)胞復(fù)蘇后,很多難以貼壁?
忽略培養(yǎng)基的問題,主要考慮細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài)差或者復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作太慢導(dǎo)致細(xì)胞死亡。切記最重要的融化速度要快,可不時(shí)搖動(dòng)冷凍管,使之盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。

5.細(xì)胞凍存時(shí)對(duì)細(xì)胞量有要求嗎?
細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)會(huì)有一定的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,起始濃度106—107個(gè)/ml/管。

恒遠(yuǎn)生物致力于建設(shè)國內(nèi)最大、種類最全的細(xì)胞與微生物標(biāo)準(zhǔn)制品資源庫,為大學(xué)、科研機(jī)構(gòu)及生物醫(yī)藥研發(fā)企業(yè)提供高質(zhì)量、可回溯、品控可靠的生物制品。主要包括原代細(xì)胞及通用細(xì)胞株、細(xì)胞培養(yǎng)周邊試劑、微生物標(biāo)準(zhǔn)品等產(chǎn)品的開發(fā)、生產(chǎn)、儲(chǔ)存和銷售。歡迎來電咨詢!
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