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酶聯(lián)免疫實驗易錯問題解答


在操作酶聯(lián)免疫試劑盒實驗時,有很多技術問題是比較常見且易錯的,而就是這些問題困惑不少實驗操作員。恒遠生物根據(jù)技術部的問題處理總結,整理出了幾個比較常見的問題,跟著小編一起往下看吧:

一、為什么必須設置復孔?
為獲得更準確的實驗結果,強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測,因為復孔檢測可以:計算平均值,確保實驗結果更準確;解決實驗中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;計算CV值,對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估。

二、重復性差怎么辦?
1.樣品數(shù)量不一,加樣時間長短不一。
2.酶標儀濾光片不對或輸入波長不對。
3.酶標儀測定重復性差。

三、為什么標準曲線線性較差?
需要按照推薦方式保存標準品;溶解標準品之前需短暫離心,徹底收集粉末;確保標準品完全溶解和混勻,然后再進行后續(xù)的系列稀釋步驟,確保每一步都充分混勻且移液;顯色的恰當終止;選擇合適的數(shù)學擬合方程繪制標準曲線。

四、為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進行加樣操作?
溫度是ELISA結合反應的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應,實驗前務必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測樣本。避免因溫度的動力學反應差異而導致ELISA檢測結果的不準確。

上海恒遠生物專業(yè)提供生命科學領域的技術服務,提供全方位實驗技術服務,為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復勞動的時間和精力,我們有過硬的技術咨詢和完善的售后服務,購買ELISA試劑盒贈送免費代測服務,在線一對一技術指導,為您解決后顧之憂。
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